项目类型: | 项目对接 | 所在地区: | 北京市 |
所属行业: | 生物医药 | ||
融资资金: | |||
融资方式: | 融资 | ||
合作方式: | 成果转化 | ||
项目阶段: | 研发 |
项目简介 |
项目简介 该团队首创了一种免提核酸的PCR技术【CLIP-PCR】, 以夹层探针杂交法将靶标核酸特异性地捕获到固相表面, 用PCR进行信号扩增而非靶标扩增。该法显著降低流程复杂度,能有效解决临床基因检测技术通量低,重复性差和成本高等问题,使得即使不具备专业技术的人员也可以进行复杂的分子检测,可解决临床分子检测领域面临的主要困境,具有广泛应用前景。 技术优势 CLIP-PCR特别适合有大批量检测需求的临床实验室和从事高通量药物筛查的科研实验室,是团队首创的世界领先技术,具有完全自主知识产权。相比于现有的以“核酸自动化提纯+荧光定量PCR”为模式的主流自动化系统具有明显优势: 1) 避免了核酸提纯以及由此造成的结果准确性、一致性较差的问题。 2) 核酸扩增结果特异性更高,很少出现非特异扩增产物。 CLIP-PCR杂交捕获时,先特异捕获,再扩增,探针浓度低,杂交时间长,探针不易结合到错误地方。且在进行扩增时,只有少量留在固体表面的核酸可作为模板,“更干净“。 3) CLIP-PCR 不易发生由气溶胶污染产生的假阳性。 因为扩增前靶标和PCR 模板被固定在固体基质表面而不是在溶液中,扩增后分析不需打开反应管。这使得自动化系统设计更简单。 4) 没有胍和醇类残余造成后续酶反应活性失活。 5) 由于是特异捕获靶标至固相而不是提取全部核酸至液相,CLIP-PCR可以进行混样检测而不损失灵敏度,因而可以大幅提高筛查通量降低成本。适用于疾病大规模筛查中常见的滤纸干血片样品。可用于输血样本混样核酸检测。 6) 可以在一个靶标分子的多个区域同时进行特异杂交捕获(multi-sectional capture), 之后用同一对通用引物同时扩增,增加灵敏度。也可避免由于某一个区域靶标序列突变造成的捕获失败影响结果。 7) 可以在一个反应中同时捕获不同靶标,并用同一套通用引物扩增,避免多重PCR带来的诸多问题。我们利用这一优点研发了无需核酸提取和多重PCR 的SNP/突变检测方法,可同时检测20-30 个位点,结果正确率高于现有常用方法商品试剂盒。 8) 已证明即使局部降解了的核酸靶标也能被检测出来,只要它仍能和探针杂交。这是因为扩增的是连接的探针不是核酸靶标。这使得自动化核酸检测系统能用于直接检测石蜡病理切片(FFPE)样品。 市场前景 我们开发的CLIP-PCR 系列高通量分子检测技术为国内外首创,已获国际同行高度认可,在分子诊断技术领域处于世界领先地位。该技术(1)可检测DNA或RNA,尤其适用于检测RNA (2) 可以检测基因表达,基因突变,SNP,DNA甲基化 (3)检测样品包括各种体液如血液,干血片,FFPE 样品, 唾液,口腔或咽拭子 (4)CLIP-PCR 可用于试管、多孔板、磁珠甚至纸芯片检测 (5)末端检测不限于qPCR,也可用恒温扩增如LAMP,Luminex 微球,Agena 核酸质谱以及靶向二代测序。 通过将样品混合、在96 孔板上进行操作,一个人、一套实验设备、一个工作位,一天(8 小时)可以轻松完成数千例样品的检测。再加上操作流程类似免疫法,容易实现自动化,使得大批量基因诊断变得简便、快速和低成本。最终使得临床上对基因诊断的技术壁垒和经济压力极大的降低。 这将大大改变临床上对传染病(例如疟疾、结核、丙肝、流感等)和癌症(利用血液中核酸标志物进行的筛查)的诊断行为和策略。本方法尤其适合需要高灵敏度检测的大规模疾病筛查应用。 目前团队已经成功的将该技术应用于我国云南寄生虫病防治所和中国疾控中心对于疟疾的根治行动中,并产生了显著的社会效益。 合作方式 融资、合作开发
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